Сэнгердин ДНК тизмеги кантип иштейт?
Сэнгердин ДНК тизмеги кантип иштейт?

Video: Сэнгердин ДНК тизмеги кантип иштейт?

Video: Сэнгердин ДНК тизмеги кантип иштейт?
Video: Секвенирование ДНК по Сэнгеру (Sanger Sequencing) 2024, Ноябрь
Anonim

Сангер секвенциясы 3' учунда дидеоксинуклеотиддер менен аяктаган ар кандай узундуктагы узартуу продуктуларынын пайда болушуна алып келет. Узартуу өнүмдөрү андан кийин капиллярдык электрофорез же CE менен бөлүнөт. Молекулалар гель полимер менен толтурулган узун айнек капиллярга электр тогу аркылуу киргизилет.

Ушундай жол менен ДНК тизмегинин Сэнгер ыкмасы деген эмне?

Сангер секвенциясы , ошондой эле чынжыр токтотуу катары белгилүү ыкма , үчүн техника ДНК тизмеги тарабынан чынжыр менен токтотулган дидеоксинуклеотиддердин (ddNTPs) тандалма кошулушуна негизделген ДНК in vitro учурунда полимераз ДНК копиялоо. Бул Фредерик тарабынан иштелип чыккан Сангер жана кесиптештери 1977 -ж.

Ошондой эле, чынжырды токтотуу ырааттуулугу кантип иштейт? Sanger DNA ырааттуулук катары да белгилүү чынжыр - токтотуу ыкмасы ырааттуулук . ddNTPs алып келет токтотуу ddNTPs нуклеотиддердин ортосунда фосфодиэфир байланышын түзүү үчүн зарыл болгон 3'-OH тобу жок болгондуктан, ДНК тилкеси. Бул байланышсыз, чынжыр нуклеотиддердин пайда болушу токтотулду.

Жөнөкөй эле, эмне үчүн биз Sanger секвенирлөө жасайбыз?

Sanger ырааттуулугу а ыкма дын ДНКнын ырааттуулугу тарабынан чынжыр менен токтотулган дидеоксинуклеотиддердин тандалма кошулушуна негизделген ДНК полимераза in vitro учурунда ДНК копиялоо. Анын дагы эле кыска окууга караганда артыкчылыгы бар ырааттуулук технологиялар (Illumina сыяктуу). алат өндүрүү ДНК ырааттуулугу > 500 нуклеотидди окуйт.

Сэнгер тизмеси такпы?

Сангер секвенциясы 99,99% менен тактык клиникалык изилдөө үчүн "алтын стандарт" болуп саналат ырааттуулук . Бирок, жаңы NGS технологиялары клиникалык изилдөө лабораторияларында кеңири жайылып баратат, анткени алардын өткөрүү жөндөмдүүлүгү жогору жана бир үлгү үчүн чыгымдар төмөн.

Сунушталууда: