Video: Гель электрофорезин жүргүзүүдө чектөө ферменттери кантип колдонулат?
2024 Автор: Stanley Ellington | [email protected]. Акыркы өзгөртүү: 2023-12-16 00:20
1 Жооп. ДНКны, РНКны же плазмидди кесүү үчүн чектөө сайттарды (EcoRI, BamHI, hindIII жана BglII сыяктуу) бөлүп, ошону менен мүнөздөлүшү мүмкүн болгон кичинекей генетикалык фрагменттерди түзүү үчүн гел электрофорез.
Ошо сыяктуу эле, кимдир бирөө: чектөө ферменттеринин ролу кайсы?
А чектөө ферменти белгилүү, кыска нуклеотид ырааттуулугун тааныган жана ДНКны ошол белгилүү жерде гана кескен белок. чектөө сайт же максаттуу ырааттуулугу. Тирүү бактерияларда, чектөө ферменттери иштейт клетканы вирустук бактериофагдардан коргоо.
Ошондой эле, кайсы чектөө ферментин колдонууну кайдан билесиз? Чектөө ферменттерин тандап жатканда, сиз төмөнкүдөй ферменттерди тандагыңыз келет:
- Кыстармаңызды капталга салыңыз, бирок кыстармаңыздын ичинде кесип албаңыз.
- Алуучу плазмидиңизде (көбүнчө бир нече клондоо сайтында (MCS)) каалаган жерде болуңуз, бирок плазмиддин башка жеринде кеспеңиз.
Мындан тышкары, изилдөөдө чектөө ферменттери кантип колдонулат?
лабораторияда, чектөө ферменттери (же чектөө эндонуклеазалары ) болуп саналат колдонулган ДНКны майда фрагменттерге кесүү. Кесүүлөр ар дайым белгилүү нуклеотиддердин тизмегинде жасалат. Башка чектөө ферменттери ар кандай ДНК тизмегин таануу жана кесип.
Гель электрофорезинин ролу кандай?
Гель электрофорез ДНК фрагменттерин өлчөмүнө жараша бөлүү үчүн колдонулган ыкма. ДНК үлгүлөрү а бир четиндеги кудуктарга (чыгууга) жүктөлөт гел , жана электр тогу аларды тартуу үчүн колдонулат гел . ДНК фрагменттери терс заряддуу, ошондуктан алар оң электродду көздөй жылат.
Сунушталууда:
Эмне үчүн чектөө ферменттери молекулярдык биологияда маанилүү?
Рестрикция ферменттери - бул ДНКдагы белгилүү бир ырааттуулукту тааныган, анан ДНКны кесүүчү фрагменттер деп аталган бактериялардан бөлүнгөн ферменттер. Рестрикция ферменттери гендерди клондоо эксперименттериндегидей рекомбинанттык ДНК молекулаларынын курулушунда абдан маанилүү роль ойнойт
Бардык бактерияларда чектөө ферменттери барбы?
Чектөө ферменттери бактерияларда (жана башка прокариоттордо) кездешет. Алар чектөө сайттары деп аталган белгилүү бир ДНК тизмектерин тааныйт жана байлашат
Табиятта чектөө ферменттери эмне үчүн колдонулат?
Чектөө энзими, ошондой эле рестрикцион эндонуклеаза деп аталат, бактериялар тарабынан өндүрүлгөн протеин, ДНКны молекула боюндагы белгилүү бир жерлерде ыдырат. Бактерия клеткасында рестриктаза ферменттери бөтөн ДНКны бөлүп, жугуштуу организмдерди жок кылат
Чектөө ферменттери деген эмне?
Чектөө энзимдери. Чектөө ферменттери же чектөө эндонуклеазалары ДНК молекуласынын ичинде кесүү үчүн колдонулган ферменттер. Чектөө ферменттерин бактериялардын ичинде тапса болот. Алар ошондой эле бактериялардан жасалган. Чектөө ферменттери ДНКны нуклеотиддердин белгилүү бир ырааттуулугунда тааныйт жана кесишет
Биотехнологияда чектөө ферменттери жана лигаза кандайча колдонулат?
Чектөө ферменттери ДНКны кесүүчү ферменттер. ДНК лигаза ДНКга кошулуучу фермент. ДНКнын эки бөлүкчөсү дал келген учтары болсо, лигаза аларды бириктирип, ДНКнын бир, үзүлбөгөн молекуласын түзө алат. ДНК клондоштурууда плазмиддерге гендерди жана ДНКнын башка бөлүктөрүн киргизүү үчүн чектөө ферменттери жана ДНК лигаза колдонулат